文献亮点:
1.采用HPLC法建立远志生品及炆制品HPLC指纹图谱,并对色谱峰进行归属。
2.结合主成分分析等方法研究远志炆制前后化学成分变化情况。
文献内容:
目的:建立远志与炆远志的HPLC指纹图谱,分析远志炆制前后化学成分的变化情况。
方法:
1.炆远志的制备:取净甘草片与净远志肉拌匀,置炆药坛内,加入相当于远志肉5倍量的40℃的温水,拌匀,盖好坛盖,放置围灶内,坛底两边以砖架起,用足量的干糠堆满坛四周,点火后炆制6h,至罐内汁水基本吸尽,糠尽灰冷时,起坛倒出,拣去甘草,60℃烘干,编号为W1~W10。每100kg远志,用甘草6kg。
2.指纹图谱的建立
2.1取远志与炆远志各10批,将数据导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)”,采用中位数矢量法多点校正,生成远志与炆远志的指纹图谱及共有模式,见图4~图7。
远志指纹图谱含有26个共有峰,炆远志指纹图谱含有31个共有峰。
2.2共有峰相对保留时间和相对峰面积的测定:远志、炆远志均含有10号色谱峰,且峰面积较高,流出时间适中,故选择10号远志蔗糖酯A色谱峰为参照峰(S)。
2.3相似度评价 将各批远志、炆远志指纹图谱数据导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)”,计算各批样品指纹图谱的相似度。,见表4、表5。
结果远志指纹图谱与对照图谱的相似度为0.912~0.985,炆远志指纹图谱与对照图谱的相似度为0.927~0.995
2.4聚类分析:以10批远志与炆远志共有峰的峰面积为原始数据
当类间距为5时,除S10号样品外,远志与炆远志样品可分别聚为一类,进一步说明远志经过炆制后其化学成分总体构成发生改变。
2.5主成分分析:对10批远志、炆远志共有峰的峰面积进行标准化,导入SIMCA?P14.1软件,以26个共有峰的相对峰面积为变量,采用非减*模式识别方法观察样品的织染聚焦情况。主成分分析得分图见图9。
远志与炆远志在主成分空间分布上均有特定区域,说明远志与炆远志化学成分存在显著差异,能够实现远志与炆远志的区分。
2.6正交偏最小二乘判别分析与差异性成分分析:在主成分分析的基础上选择有监督模式的偏最小二乘判别分析,得到VIP值,见图10。
VIP越大,即变量离X轴越远,表明该色谱峰对于远志与炆远志的分类贡献越大,也是导致远志与炆远志相区分的差异成分。其中VIP>1的有16个色谱峰,依次为2、5、26、14、8、20、10、25、9、22、17、4、24、6、15、3号,其为导致差异的主要成分。
参考文献:崔月莉,吴鹏,张丹捷,周巧,甄臻,赵鑫,张学兰.远志与炆远志HPLC指纹图谱比较[J/OL].中药材,(03):-[-12-15].